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以下是關(guān)于大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒的實驗使用說明，綜合了多個來源的可靠信息：
BS-2970 大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒
一、實驗原理
采用雙抗體夾心法檢測樣本中IL-5含量。預(yù)包被抗大鼠IL-5抗體的微孔板捕獲樣本中的IL-5，再依次加入生物素化檢測抗體和HRP標記的鏈霉親和素，形成復(fù)合物后通過TMB顯色反應(yīng)定量。顏色深淺與IL-5濃度成正比，通過標準曲線計算含量?。
二、試劑盒組成
核心組分?：預(yù)包被酶標板、標準品(凍干粉，需復(fù)溶)、生物素化抗體、HRP酶結(jié)合物、TMB顯色液、終止液?
輔助溶液?：20×濃縮洗滌液(需1:20稀釋)、樣品稀釋液、標準品稀釋液?
耗材?：封板膜、密封袋?
三、樣本處理要求
血清/血漿?：采集后室溫靜置10-20分鐘，2000-3000g離心20分鐘，避免溶血或脂血干擾?。
細胞培養(yǎng)上清?：直接離心去除顆粒物，-20℃保存時避免反復(fù)凍融?。
組織勻漿?：PBS沖洗后稱重勻漿，離心取上清，建議添加蛋白酶抑制劑?。
四、標準操作步驟
標準品稀釋?：復(fù)溶后梯度稀釋(如2000-31.2 pg/mL)，建議設(shè)置8個濃度點?。
加樣與孵育?：
每孔加100μL樣本或標準品，37℃孵育90分鐘
洗滌5次后加入生物素化抗體(100μL/孔)，37℃孵育60分鐘?
顯色與檢測?：
加入TMB底物避光顯色15分鐘，終止反應(yīng)后30分鐘內(nèi)測定450nm吸光度?。
五、關(guān)鍵注意事項
質(zhì)量控制?：每板需設(shè)空白孔和標準曲線，OD值需扣除空白背景?。
干擾避免?：避免使用NaN3防腐劑(抑制HRP活性)，溶血/高脂樣本需預(yù)處理?。
保存條件?：未使用的板條需密封干燥保存于2-8℃，標準品復(fù)溶后需當日使用?。
六、性能參數(shù)
檢測范圍?：典型為15.6-1000 pg/mL，靈敏度可達3.9 pg/mL?。
精密度?：板內(nèi)/板間變異系數(shù)分別<10%
注：以上資料僅供參考，不作為實驗依據(jù)，具體請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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