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人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/7/28瀏覽:278次
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  以下是?人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒?的詳細實驗使用說明,綜合各品牌試劑盒通用操作流程及注意事項整理:

  BS-1395人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒

  一、試劑盒組成?

  預包被微孔板?:抗IDUA抗體包被的96孔或48孔板?。

  標準品?:濃度梯度為0.156-10 ng/mL(具體以說明書為準)?。

  檢測抗體?:HRP標記的IDUA抗體?。

  底物溶液?:TMB顯色液?。

  終止液?:酸性溶液(如2M H?SO?)?。

  洗滌緩沖液?:20-25倍濃縮液,需稀釋使用?。

  二、樣本處理?

  適用樣本?:血清、血漿(EDTA/肝素抗凝)、細胞裂解液、組織勻漿等?。

  預處理要求?:

  血清/血漿:離心去除雜質(zhì)(1000×g,15-20分鐘),避免溶血?。

  組織樣本:勻漿后離心取上清?。

  保存條件?:短期2-8℃,長期需-20℃凍存,避免反復凍融?。

  三、實驗步驟?

  試劑平衡?:所有組分室溫平衡15-30分鐘(TMB需避光)?。

  加樣?:

  標準品/樣本每孔加50-100μL,復孔建議?。

  空白孔加稀釋液對照?。

  孵育?:37℃避光孵育1-5小時(具體時間參考說明書)?。

  洗滌?:

  棄液后每孔加洗滌液300μL,靜置30秒后拍干,重復5次?。

  加檢測抗體?:每孔加HRP標記抗體100μL,37℃孵育1小時?。

  顯色?:

  加TMB底物100μL,避光反應10-30分鐘(顯藍色)?。

  加終止液50μL,顏色轉為黃色?。

  檢測?:450nm波長測OD值(參考630nm校正)?。

  四、數(shù)據(jù)分析?

  標準曲線?:以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,擬合四參數(shù)曲線?。

  濃度計算?:樣本OD值代入曲線方程,乘以稀釋倍數(shù)?。

  五、注意事項?

  質(zhì)量控制?:

  每板需做標準曲線及復孔,CV%應<10%?。

  樣本OD值超范圍時需稀釋后重測?。

  操作細節(jié)?:

  避免板孔干燥,孵育時覆蓋封板膜?。

  加樣需精準,建議使用多道移液器?。

  保存條件?:

  未用板條密封保存于2-8℃或-20℃?。

  底物避光,終止液腐蝕性需防護?。

  六、技術參數(shù)?

  檢測范圍?:0.156-10 ng/mL(靈敏度0.039 ng/mL)?。

  精密度?:板內(nèi)CV<8%,板間CV<10%?。

  注:以上資料僅供參考,如需具體品牌說明,可聯(lián)系供應商獲取完整文檔?。

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