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大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
發(fā)布時(shí)間:2025/9/10瀏覽:96次
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  大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理

  基于雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)技術(shù),具體流程如下:

  固相抗體包被?

  微孔板預(yù)先包被抗VEGF-C單克隆抗體,形成固相捕獲抗體?。

  抗原-抗體結(jié)合?

  加入待測(cè)樣本(如血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清),樣本中的VEGF-C與固相抗體特異性結(jié)合,形成“固相抗體-VEGF-C"復(fù)合物?。

  酶標(biāo)抗體反應(yīng)?

  加入生物素標(biāo)記的抗VEGF-C多克隆抗體(檢測(cè)抗體),與已結(jié)合的VEGF-C結(jié)合,形成“固相抗體-VEGF-C-酶標(biāo)抗體"夾心結(jié)構(gòu)?。

  信號(hào)檢測(cè)?

  洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后,加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素(鏈霉親和素-HRP)?。

  加入底物TMB(四甲基聯(lián)苯胺),HRP催化TMB顯色(藍(lán)色→黃色),顏色深淺與VEGF-C濃度成正比?。

  酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度?。

  關(guān)鍵特性?:

  檢測(cè)范圍通常為15.6–1000pg/ml?。

  特異性針對(duì)VEGF-C亞型(,避免與其他VEGF家族成員交叉反應(yīng)?。

  適用于科研實(shí)驗(yàn)

  注意事項(xiàng)?:

  樣本需避免反復(fù)凍融,血清/血漿樣本需使用無熱原試管收集?。

  實(shí)驗(yàn)重復(fù)性要求板內(nèi)變異系數(shù)<10%,板間<15%?。

  注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說明請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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