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大鼠血管緊張素1型受體(AT1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
發(fā)布時(shí)間:2025/9/18瀏覽:116次
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  大鼠血管緊張素1型受體(AT1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

  大鼠AT1受體ELISA試劑盒基于?雙抗體夾心法?(Sandwich ELISA)原理,通過特異性抗體捕獲目標(biāo)蛋白并定量檢測其濃度?。

  1. ?核心步驟?

  包被抗體固定?:微孔板預(yù)包被抗大鼠AT1受體的單克隆抗體,形成固相捕獲層?。

  抗原-抗體結(jié)合?:樣本(如大鼠血清、組織勻漿)中的AT1受體與包被抗體結(jié)合,形成“抗體-抗原"復(fù)合物?。

  酶標(biāo)二抗反應(yīng)?:加入生物素標(biāo)記的二抗(如抗AT1受體多抗),與抗原結(jié)合后形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物?。

  顯色檢測?:加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親和素(SABC)和底物(TMB),酶催化反應(yīng)

  生成藍(lán)色產(chǎn)物,終止后變黃色,450nm測吸光度(OD值)?。

  2. ?定量分析?

  標(biāo)準(zhǔn)曲線法:通過已知濃度的AT1受體標(biāo)準(zhǔn)品建立OD值與濃度的線性關(guān)系,樣本濃度通過曲線擬合計(jì)算?。

  靈敏度與范圍:典型檢測范圍為3.12-200 ng/mL,適用于大鼠樣本中AT1受體的高靈敏度檢測?。

  3. ?技術(shù)特點(diǎn)?

  特異性?:抗體對(duì)AT1受體具有高親和力,避免與其他血管緊張素受體(如AT2)交叉反應(yīng)?。

  信號(hào)放大?:生物素-親和素系統(tǒng)增強(qiáng)信號(hào),提高檢測靈敏度?。

  4. ?應(yīng)用場景?

  心血管研究?:分析AT1受體在高血壓、心肌肥厚等疾病模型中的表達(dá)變化?。

  藥物篩選?:評(píng)估AT1受體拮抗劑的藥效?。

  5. ?注意事項(xiàng)?

  樣本處理?:避免反復(fù)凍融,血清/血漿需離心去除顆粒物?。

  干擾因素?:高脂或溶血樣本可能影響結(jié)果,需預(yù)處理?。

  注:以上僅供參考,科研使用,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。

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